淺析肌聯蛋白抗體檢測試劑盒的使用流程

更新時間：2025-01-10

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　　肌聯蛋白抗體檢測試劑盒是一種用于檢測人血清或血漿中肌聯蛋白抗體(TitinAb)的實驗工具。該試劑盒在臨床上具有重要的應用價值，尤其在重癥肌無力(Myasthenia Gravis,MG)和胸腺瘤等疾病的診斷中，主要用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中的肌聯蛋白抗體含量，試劑盒應保存在2-8℃的環境中，有效期為6個月。

　　肌聯蛋白抗體檢測試劑盒通常采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。這種方法通過預先包被豚鼠肌聯蛋白抗體(TTN)捕獲抗體的微孔板，依次加入標本、標準品和HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌后，用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺與樣品中的肌聯蛋白抗體濃度呈正相關，通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，即可計算出樣品濃度。

　　在使用肌聯蛋白抗體檢測試劑盒時，需按照以下步驟進行：

　　1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl。注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　2.溫育：用封板膜封板后，37℃反應120分鐘。

　　3.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干。每孔加生物素標記抗體工作液100μl，37℃溫育60分鐘。再次洗滌后，每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液100μl，37℃溫育60分鐘。洗滌5次。

　　4.顯色：依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色30分鐘。

　　5.終止：依序每孔加終止溶液50μl，終止反應。

　　6.測定：用酶標儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內進行檢測。

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